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                  企業動態

                  ELISA實驗結果不顯色的原因及實驗中如何防止產生氣泡
                  更新時間:2023-11-15   點擊次數:181次

                    ELISA實驗結果不顯色的原因及實驗中如何防止產生氣泡


                    ELISA實驗結果不顯色是什么原因導致:

                    有很多一些新手ELISA試驗人員來說,試驗做得不理想是難免的事。這不,就在近期一個朋友找古朵生物小編咨詢。這位朋友說道:“初次用間接法做ELISA試驗,做了幾回結果都沒有顯色,原因在哪里呢"

                    可能原因有這幾個方面:

                    1.包被原:包括你的包被液有無問題,有沒有配錯。包被原一般加100微升,37度2小時;

                    2.關閉:關閉液用的是否合適?你說做了幾回都沒顯色,空白孔也不顯嗎?假如空白也無色彩,那關閉就沒有問題。一般關閉是200微升每孔,也能夠滿孔關閉

                    3.一抗:查看你的一抗是否失效。是否是在37度反響

                    4.二抗:底物,底物緩沖液……這些都要好好查看!

                    5.洗刷:用PBST洗刷,包被和關閉時洗板3次;一抗二抗洗刷5次,每次間隔3分鐘。手工和機器洗刷沒什么不同,就是省力一些。洗5次不會有負影響,在一抗和二抗洗刷過程中,恰恰需求多洗幾回,這樣有助于削減非特異性吸附。

                    ELISA試驗中如何防止產生氣泡:

                    一般氣泡都是集合在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有用觸摸,使孔內反響不均一。

                    包被時有氣泡的話,將導致包被不實踐包被量下降--弱陽性乃至假陰性。

                    關閉時有氣泡的話,將導致很多未結合位點的存在,引起非特異性結合--本底增高,假陽性。

                    加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性。

                    加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性(競爭法相反----假陽性)。

                    加顯色液時有氣泡的話---顯色不。

                    加停止液時有氣泡的話,1。不能停止反響 2。影響酶標儀比色,OD值增高

                    洗刷時有氣泡的話,非特異性結合物不能洗去,做無用功。

                    防止辦法:

                    1。加樣時盡量接近孔底(不要觸摸孔底),用力均勻,不要過快過猛。

                    2。關閉時一定要加滿孔,

                    3。洗刷時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來zui終驅除。手藝洗板時一定要吸干水分并用力拍干。

                    ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒

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