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                  技術支持

                  DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明書
                  更新時間:2023-03-20   點擊次數:681次

                   

                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明書

                   

                    中文名:DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B

                    英文名:DEAE Sepharose CL-6B

                    規格:100ml、500ml

                    粒徑: 45-165μm

                    配基基團:carboxymethyl(羧甲基)

                    總離子交換量:0.09-0.13mmol/g凝膠

                    工作PH值:6-10

                    操作溫度:4-40℃

                    性狀(以下信息僅供參考):含20%乙醇,底部為乳白色膠體。

                    保存:2~8℃

                    用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)適用于各種帶陽性電荷生物大分子的濃縮純化等。

                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B

                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B適用范圍

                    本產品具有高化學穩定性、高流速、高載量、好的機械性能、可在位清洗、多次重復使用等特點,非特異性吸附低,回收率高,適用于工業規模生產,適用于在pH工作范圍內可形成負離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的離子交換制備。

                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用方法

                    1、裝柱:

                    a、讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

                    b、根據柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。

                    c、將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。

                    d、用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。

                    e、打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

                    2、平衡:

                    讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液,如Tris 、PBS等。

                    3、上樣:

                    a、樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

                    b、一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。

                    c、介質對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質、流動相的離子強度和pH值。鹽濃度小,介質對樣品組分吸附較牢。用DEAE介質時,推薦的pH值是大于目標產品等電點1個單位。

                    4、洗脫:

                    DEAE介質可用增大鹽濃度或減小pH值進行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。

                    5、再生

                    一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積,接著用結合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用;若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。

                    6、在位清洗

                    a、對于以離子鍵結合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。

                    b、對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。

                    c、對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡;清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。

                    7、注意:在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入;在使用過程中,不能使用強酸,如使用酸洗,應使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。

                    8、去熱源:用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:

                    a、2倍柱體積的70%乙醇;

                    b、2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;

                    c、1倍柱體積4M尿素;

                    d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl;

                    e、以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

                    9、消毒用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。

                    10、滅菌置介質于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。

                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B注意事項

                    1、產品應密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。

                    2、本產品避免與氧化劑接觸;避免在pH值<4時長時間暴露(一周,20℃)。

                    3、保質期:5年。

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                    DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。

                   

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